OBJETIVO: Avaliar a suscetibilidade, in vitro, de Staphylococcus coagulase negativa (SCoN), isolados da conjuntiva e córnea, à meticilina, às fluoroquinolonas e aos aminoglicosídeos. MÉTODOS: Foram analisadas retrospectivamente 707 amostras oculares de SCoN quanto à suscetibilidade aos antimicrobianos pelo teste de disco difusão, durante o período de janeiro de 2000 a dezembro de 2003. RESULTADOS: Houve um aumento do número de SCoN em isolados da conjuntiva (n=57, ano de 2000 e n=153, ano de 2003) e da córnea (n=28, ano de 2000 e n=78, ano de 2003). A freqüência de SCoN resistentes à meticilina isolados da conjuntiva e da córnea, aumentou (1,8 a 19,6% e 14,3 a 29,3% respectivamente) durante o período avaliado. Não houve diferença estatisticamente significante nos anos estudados, nos percentuais de SCoN resistentes às fluoroquinolonas, nas conjuntivas (ofloxacina: 1,8 a 7,8% e ciprofloxacina: 3,5 a 9,2%) e nas córneas (ofloxacina: 14,3 a 9,0% e ciprofloxacina:14,3 a 10,3%). Avaliando-se os resultados das amostras isoladas da conjuntiva, observou-se um aumento na resistência à tobramicina: 15,8 a 34,6%; e à gentamicina: 10,5 a 25,5%; mas não houve mudança no perfil de resistência das amostras da córnea à tobramicina: 28,6 a 26,9% e à gentamicina: 21,4 a 23,1%). CONCLUSÃO: Houve diminuição na suscetibilidade in vitro dos SCoN para meticilina, tobramicina e gentamicina. As fluoroquinolonas, representadas pela ofloxacina e ciprofloxacina, demonstraram ter um padrão estável de suscetibilidade in vitro.

PURPOSE: To assess the in vitro susceptibility of conjunctival and corneal coagulase negative Staphylococcus (CoNS) to methicillin, fluoroquinolones and aminoglycosides. METHODS: A total of 707 conjunctival and corneal CoNS disk diffusion test results were retrospectively analyzed, from January 2000 through December 2003. RESULTS: From 2000 to 2003, there was an increase in number of CoNS isolated from conjunctiva (n=57 to n=153) and cornea (n=28 to n=78). The frequency of conjunctival and corneal methicillin-resistant CoNS also increased (1.8 to 19.6% and 14.3 to 29.3%, respectively). There was no statistically significant difference between fluoroquinolones-resistant CoNS percentages in conjunctiva (ofloxacin: 1.8 to 7.8% and ciprofloxacin: 3.5 to 9.2%) and cornea (ofloxacin: 14.3 to 9.0% and ciprofloxacin: 14.3 to 10.3%). Evaluating the results of the conjunctival samples, there was increased resistance to tobramycin (15.8 to 34.0%) and to gentamycin (10.5 to 25.5%). There was no change in resistance of corneal isolates to tobramycin (28.6 to 26.9%) and to gentamycin (21.4 to 23.1%). CONCLUSIONS: there was a decrease in in vitro CoNS susceptibility to methicillin, tobramycin and gentamycin. Fuoroquinolones represented by ofloxacin and ciprofloxacin demonstrated stable in vitro susceptibility.

OBJETIVOS: Avaliar os diferentes métodos de suscetibilidade à oxacillina, em isolados oculares, considerando a reação em cadeia da polimerase (PCR) como "padrão-ouro" e comparar a suscetibilidade in vitro para outros antimicrobianos de uso oftalmológico. MÉTODOS: O sistema automatizado Vitek foi utilizado para identificar as diferentes espécies de Staphylococcus coagulase negativo (SCoN). A presença do gene mecA foi determinado pela reação em cadeia da polimerase com a combinação de 2 "primer" sets (mecA e 16S rRNA) em uma única região. Estes resultados foram analisados e comparados com outros métodos de suscetibilidade à oxacilina: detecção da proteína PBP2a pelo teste de aglutinação em látex (SLA); E-test oxacilina; o sistema automatizado Vitek (GPS-105); o teste de triagem em ágar (OSAS) com oxacilina nas concentrações de 6,0, 1,0 e 0,75 µg oxacilina por ml e o teste de disco difusão com cefoxitina (CDD). A suscetibilidade automatizada foi obtida para os seguintes agentes antimicrobianos: fluorquinolonas, penicilina G, amoxicilina-ampicilina, cefazolina, ampicilina-sulbactam, eritromicina, clindamicina, gentamicina, tetraciclina, sulfametoxazol-trimetoprima, vancomicina e rifampicina. RESULTADOS: Dos 69 Staphylococcus coagulase negativo testados, 71% foram mecA-positivos e 29%, mecA-negativos. Todos os métodos testados apresentaram concordância estatisticamente significante com a reação em cadeia da polimerase. Houve tendência à predominância da positividade da reação em cadeia da polimerase entre os S. epidermidis comparado aos não-epidermidis, embora sem significância estatistica (78,3% vs. 56,5%; chi2= 2,54; p=0,11). O teste de triagem em ágar (0,75 µg oxacilina/ml) apresentou a melhor performance com resultados de: 100% de sensibilidade e valor preditivo negativo, 95% de especificidade e 98% de valor preditivo positivo. Os isolados mecA-positivos foram estatisticamente significativavos mais resistentes para ciprofloxacina, ofloxacina, gatifloxacina e moxifloxacina, no E-test (p=0,002; p=0,008; p=0,002 e p=0,003). Houve maior proporção estatisticamente significativa de resistência entre os Staphylococcus coagulase negativo mecA-positivos para: penicilina G, amoxicilina-ampicilina, cefazolina, ampicilina-sulbactam, eritromicina, clindamicina, gentamicina e tetraciclina. (p<=0,05) Todos os Staphylococcus coagulase negativos foram suscetíveis à vancomicina e não houve correlação estatisticamente significativa entre as amostras mecA-positivas e a resistência para sulfametoxazol-trimetoprima e rifampicina. CONCLUSÕES: No presente estudo, foi observado que o E-test e o OSAS (0,75 µg oxacilina por ml), comparado à reação em cadeia da polimerase, foram os métodos fenotípicos mais acurados em detectar a resistência à oxacilina nos Staphylococcus coagulase negativos. Foi demonstrado que os testes de disco difusão com cefoxitina e o método automatizado (Vitek) são boas opções para a triagem da resistência à oxacilina em laboratórios de microbiologia ocular. Destacou-se a importância de métodos acurados para detectar a resistência à meticilina dentre as espécies menos freqüentemente encontradas, considerando a crescente importância destes patógenos oportunistas.

PURPOSE: To evaluate different methods of oxacillin susceptibility testing of ocular isolates, considering polymerase chain reaction (PCR) as the 'gold standard', and to compare the in vitro susceptibility to oxacillin with that of other antimicrobials used in ophthalmologic practice. METHODS: The Vitek gram-positive identification card was used to identify ocular coagulase negative Staphylococcus species. The presence of the mecA gene was determined by the polymerase chain reaction assay with a combination of two primer sets (mecA and 16S rRNA) in a single region. Results were analyzed and compared with other oxacillin susceptibility methods: PBP2a detection by rapid slide latex agglutination test (SLA); oxacillin E-test; the Vitek automated gram-positive susceptibility card (GPS-105); the oxacillin salt agar screening test (OSAS) at a concentration of 6.0, 1.0 and 0.75 µg oxacillin per ml and the cefoxitin disk diffusion test (CDD). Automated susceptibility was also determined to other antimicrobial agents (fluoroquinolones, penicillin G, amoxicillin-ampicillin, cefazolin, ampicillin-sulbactam, erythromycin, clindamycin, gentamicin, tetracycline, trimethoprim-sulfamethoxazole, vancomycin and rifampin. RESULTS: Of the 69 CoNS isolates tested, 71% were mecA-positive and 29% mecA-negative. All methods tested had a statistically significant agreement with polymerase chain reaction. There was a tendency of positive polymerase chain reaction predomination among the S. epidermidis isolates in comparison to non-epidermidis isolates, although this was not statistically significant (78.3% vs. 56.5%; chi2= 2.54; P= 0.11). The oxacillin salt agar screening test (0.75 µg oxacillin/ml) showed the best performance, with 100% sensitivity and negative predictive value; 95% specificity and 98% positive predictive value. Using the E-test, the mecA-positive isolates were statistically significantly more resistant to ciprofloxacin, ofloxacin, gatifloxacin and moxifloxacin (P= 0.002; P= 0.008; P= 0.002 and P= 0.003, respectively). There was a statistically significant higher proportion of resistance of the coagulase negative Staphylococcus mecA-positives for: penicillin G, amoxicillin-ampicillin, cefazolin, ampicillin-sulbactam, erythromycin, clindamycin, gentamicin and tetracycline (P<0.05). All coagulase negative Staphylococcus species were susceptible to vancomycin and there was no statistically significant correlation between the mecA-positive isolates and resistance to trimethoprim-sulfamethoxazole or to rifampin. CONCLUSIONS: In the present study, we found that the E-test and the oxacillin salt agar screening test S (0.75 µg oxacillin per ml), when compared with polymerase chain reaction, were the most accurate currently available methods to phenotypically detect oxacillin resistance of coagulase negative Staphylococcus species. This study demonstrated that a good option for screening of ocular isolates for oxacillin resistance in the microbiology laboratory is the cefoxitin disk diffusion test and the automated Vitek system. We believe it is important to have available methods that accurately detect methicillin resistance of the less commonly encountered species, chiefly because of their increasing importance as opportunistic pathogens.

OBJETIVOS: Avaliar a suscetibilidade a fluorquinolonas dos Staphylococcus coagulase-negativo (SCoN) identificados no Laboratório de Microbiologia Ocular da Unifesp. MÉTODOS: Foi determinada a concentração inibitória mínima de 21 cepas de SCoN meticilina-resistentes e 22 meticilina-sensíveis para ciprofloxacina, ofloxacina, gatifloxacina e moxifloxacina, utilizando o E-test estandartizado pelo CLSI/NCCLS. RESULTADOS: Os MIC90 (µg/ml) de 43 SCoN isolados para fluorquinolonas de segunda geração foram maiores do que os de quarta geração, principalmente para o grupo dos meticilina-resistentes. CONCLUSÃO: Nossos resultados indicam que Staphylococcus coagulase-negativo meticilina-sensíveis são mais suscetíveis às quinolonas do que os Staphylococcus coagulase-negativo meticilina-resistentes, fluorquinolonas de quarta geração parecem ser mais potentes, cobrindo inclusive cepas de Staphylococcus coagulase-negativo resistentes à segunda geração de fluorquinolonas.

PURPOSE: To evaluate the fluoroquinolone susceptibilities of ocular isolate coagulase-negative staphylococci (CoNS), identified at the Microbiology Laboratory - UNIFESP. DESIGN: Experimental laboratory investigation. METHODS: The minimum inhibitory concentrations (MICs) of 21 strains of methicillin-resistant coagulase-negative staphylococci (MRCoNS) and 22 methicillin-sensitive coagulase-negative staphylococci (MSCoNS) to ciprofloxacin, ofloxacin, gatifloxacin and moxifloxacin were determined, using the E-test method standardized by the Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI/NCCLS). RESULTS: The MIC90s (µg/ml) for the second generation of tested fluoroquinolones were higher than the fourth generation, especially for the methicillin-resistant coagulase-negative staphylococci group. CONCLUSION: Our results indicate that methicillin-sensitive coagulase-negative staphylococci are more susceptible to quinolones than are methicillin-resistant coagulase-negative staphylococci and that fourth generation fluoroquinolones appear to be more potent, affecting even coagulase-negative staphylococcal strains resistant to second generation fluoroquinolones.

Objetivo: Avaliar a resposta terapêutica inicial instituída para úlceras de córneas infecciosas correlacionando-a com os achados laboratoriais. Métodos: Foram estudados prospectivamente 24 casos de úlcera de córneas infecciosas atendidos no Setor de Córnea e Patologia Externa do Hospital do Servidor Público Estadual - São Paulo, no período entre julho de 1997 e novembro de 1999. Acompanhou-se a resposta destes pacientes ao tratamento antibiótico inicial (cefalotina 50 mg/ml e gentamicina 14 mg/ml ou ciprofloxacina 0,3%), verificando-se a necessidade de modificação deste tratamento a partir dos testes microbiológicos pré-tratamento. Resultados: Dezessete culturas (70,83%) foram positivas e sete (29,17%) negativas. Apenas em três amostras analisadas pelo exame direto e coradas pelo método de Gram, observou-se a presença de algum microrganismo, sendo que em duas (8,33%) houve correlação com a cultura. Três pacientes (12,5%) apresentaram piora clínica e foram submetidos à mudança da medicação inicialmente instituída de acordo com a cultura e antibiograma. Todos os pacientes (100%) cursaram com a cura do processo infeccioso. Conclusão: Pela análise dos resultados, observa-se que o tratamento tópico com antibióticos de amplo espectro ou associação de colírios com antibióticos fortificados foi, na maioria dos casos, eficaz na abordagem terapêutica inicial das ceratites infecciosas.

Purpose: To evaluate the initial treatment of infectious corneal ulcers and their laboratory tests. Methods: Twenty four cases of infectious corneal ulcers seen in the External Corneal Disease Section at the Hospital do Servidor Público Estadual - São Paulo - Brazil, underwent Gram staining and culture for bacterial and fungus. Treatment with fortified cefalotine (50 mg/ml) and gentamicin (14 mg/ml) was started. Results: Seventeen cultures (70.83%) were positive for bacterial infection and seven (29.17%) showed no growth. In three cases (15.76%) the Gram staining showed correlation with the culture. Three cases did not respond to the initial treatment and had the medications changed according to the results of the cultures. All patients responded to the clinical treatment. Conclusions: Ours results showed that combination of fortified cefalotine and gentamicin eye drops was efficient to treat most of the infectious corneal ulcers.